小鼠ELISA試劑盒在實驗前要做好哪些準備工作？

　　小鼠elisa試劑盒是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。

 

　　小鼠ELISA試劑盒的實驗原理：                                     

　　將目標抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合，然后加入微生物化的目標抗體，將未結合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標記和親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

 

　　實驗前的準備工作：

　　1、準備好所有實驗額外所需物品，如試管 吸頭 移液器 離心機等；

　　2、確定試劑盒在有效期內；

　　3、仔細閱讀說明書；

　　4、按說明書確定所有試劑齊全（數量 體積）；

　　5、標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份；

　　6、根據檢測標本數量確定所需試劑的量；

　　7、按說明書將所用試劑盒平衡至室溫，配制所需試劑。

 

　　小鼠ELISA試劑盒的洗板方法：

　　1、手工洗板方法：將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內，浸泡1-2分鐘，吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體，在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次，根據需要，重復此過程數次。

　　2、自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。本試劑盒可同時檢測，且與其它相關蛋白無交叉反應。